液氮保存植物材料的方法 液氮保藏法
1、液氮保藏法,亦稱超低溫保藏法。主要利用微生物在低於-130°C的低溫下新陳代謝趨於停止的原理,在液氮中(-196°C的超低溫下)有效地進行菌種保藏的方法。此法操作簡便、高效,保藏期一般可達到15年以上,是公認的菌種長期保藏技術之一,並且適用於各類微生物菌種的保藏。但是,採用液氮保藏,需購置超低溫液氮設備,且液氮消耗量大,費用高。液氮低溫保藏的保護劑,一般選擇甘油、二甲基亞碸、糊精、血清蛋白、聚乙烯氮戊環、吐溫80等,最常用的是甘油(10%〜20%),不同微生物應選擇不同的保護劑,保護劑的濃度應控制在不造成微生物死亡爲宜。
2、把微生物細胞混懸於含保護劑(20%甘油,10%DMSO等)的液體培養基中(也可把含菌瓊脂塊直接浸入含保護劑的培養液中),分裝入耐低溫的安瓿瓶中後,作緩慢預冷,然後移至液氮罐中的液相(-196℃)或氣相(-156℃)作長期超低溫保藏。
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