細菌的保存方法 細菌保存的常用方法
1、細菌保存於穿刺培養物中:一般細菌保存於穿刺培養物可以維持兩年。具體方法如下:用滅菌接種針挑取分散良好的單菌落,針緩慢穿過瓊脂到達瓶底,連續幾次,蓋上瓶蓋擰緊,做好標記。室溫下存放於暗處。(最好一點可以將瓶蓋放鬆,在適當溫度下培養過夜,再擰緊瓶蓋並加封Parafilm膜,室溫或最好在4度避光保存)。
2、細菌保存於含有甘油的培養物中:(1):在液體培養基中生長的細菌培養物:取0.85ml細菌培養物,加入0.15ml高壓滅菌甘油,振盪培養物使甘油分佈均勻,然後轉移到標記好的保存管內,密封,在乙醇-乾冰或液氮中凍結後再轉至-70度長期保存。在復甦時,用滅菌接種針刮取凍結的培養物表面,然後立即把黏附於接種針上的細菌劃於含適當抗生素的LB瓊脂平板表面,於37度過夜。
(2):在瓊脂平板上生長的細菌培養物:從瓊脂平板表面刮下細菌放入裝有2mlLB的無菌試管內,再加入等量的含有30%滅菌甘油的LB培養基,振盪使甘油完全分佈均勻後,分裝於無菌保存管內,密封,再按前述方法冰凍保存。這一方法的優點在於可用於保存在質粒載體上建立的cDNA文庫。
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