瓊脂糖凝膠電泳原理 瓊脂糖凝膠電泳原理簡述
1、瓊脂糖凝膠電泳原理:瓊脂糖凝膠具絡,物質分子通過時到阻力,大分子物質在涌動時受到的阻力大,因此在凝膠電泳中,帶電顆粒的分離不僅取決於淨電荷的性質和數量,而且還取決於分子大小,這就大大提高了分辨能力。但由於其孔徑相比於蛋白質太大,對大多數蛋白質來說其分子篩效應微不足道,現廣泛應用於核酸的研究中。瓊脂糖凝膠電泳是用瓊脂糖作支持介質的一種電泳方法。其分析原理與其他支持物電泳最主要區別是:它兼有“分子篩”和“電泳”的雙重作用。
2、核酸是兩性電解質,其等電點爲pH2-2.5,在常規的電泳緩衝液中(pH約8.5),核酸分子帶負電荷,在電場中向正極移動。核酸分子在瓊脂糖凝膠中泳動時,具有電荷效應和分子篩效應,但主要爲分子篩效應。線狀雙鏈DNA分子在一定濃度瓊脂糖凝膠中的遷移速率與DNA分子量對數成反比,分子越大則所受阻力越大,也越難於在凝膠孔隙中移動,因而遷移得越慢。
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