酵母细胞基因组rna的提取
酵母细胞基因组RNA的提取一般可以按照以下步骤进行:
1. 提取细胞总RNA:将酵母细胞收集后用三倍体积的Trizol或RNeasy提取试剂按照说明书操作,可将总RNA提取出来。
2. 消化DNA:将总RNA加入DNase消化缓冲液,用DNase I酶消化,将DNA降解掉。
3. 纯化RNA:将消化完DNA的RNA取出后,加入等体积的Phenol/Chloroform提取试剂,混匀后转到离心管内离心10min,配合氯仿/异戊醇萃取后得到RNA。
4. 定量RNA浓度:用分光光度计测定RNA的吸光度(OD260)和纯度(OD260/OD280),算出RNA的浓度。
5. 模板制备:根据实验需要和RNA的有效性,可选择使用不同的方法进行DNA和cDNA的合成。常用的方法有RT-PCR和Real-time PCR。
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